В статье о методике переливания размороженных эритроцитов и законах, регулирующих данную операцию (это, по сути, пересадка чужеродной ткани), мы говорили о разморозке замороженной крови и отмывании ее составных частей, в частности красных кровяных телец, от криофилактических веществ. Из последних самой большой популярностью в СССР, а потом и в РФ, пользовался глицерин. Во всем мире было разработано множество методик проведения деглициниризации размороженных эритроцитов. Но одним из самых простых и надежных является методика ЛНИИГПК (НИИ «Гематологии и переливании крови» в городе Ленинграде), о котором мы расскажем ниже.
Метод деглицеринизации размороженных эритроцитов
Предлагаемый метод деглицеринизации размороженных эритроцитов, криоконсервированных с раствором ЦОЛИПК 114 при T=-196°C, предусматривает двукратное центрифугирование.
Ниже описаны этапы деглицеринизации размороженных эритроцитов:
- В условиях бокса со строгим соблюдением требований асептики взвесь размороженных эритроцитов (250 мл) из металлического контейнера переливают в стеклянный флакон емкостью 500 мл и к ней добавляют 250 мл 30% сахарозы (или 16% Д-сорбита, или 16 % маннита) на 0,9 % растворе хлорида натрия. Тщательно перемешивают взвесь на специальном лабораторном оборудовании (подробности на http://temp78.ru/) и центрифугируют в течение 20 мин (1500 об/мин), супернатант удаляют.
- К полученному осадку эритроцитов (около 125 мл) добавляют такой же объем (125 мл) 10% сахарозы (или 5% Д-сорбита, или 5% маннита) на 0,9% растворе хлорида натрия. Взвесь тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. Через 5 мин в полученную суспензию добавляют 0,9% раствора хлорида натрия в объеме, равном объему суспензии (250 мл). После перемешивания полученную взвесь (500 мл) центрифугируют в течение 20 мин (1500 об/мин), сливают надосадочный слой и к оставшимся эритроцитам добавляют раствор ЦОЛИПК 86 в соотношении 1:1. Полученная взвесь в среднем содержит 5,9±0,72 г/л глицерина и 8,14±0,08 г/л свободного гемоглобина, что не превышает допустимых норм. Однако однократная доза эритроцитов, приготовленных данным методом, при переливании не должна превышать 1000 мл. Срок хранения размороженных эритроцитов, деглицеринизированных данным методом, не более суток.
| 
